葛根素注射液質量研究發表省級職稱論文

　　【摘要】 目的：葛根素注射液的變色、pH值快速下降、過敏反應發生率高、三大質量問題嚴重影響了該品種的生產和使用，必須加以研究解決。方法：分析了各種問題產生的原因，確定了解決辦法。結果：按新方法制備的成品，全部解決了上述質量問題。結論：改進后生產的成品質量穩定可靠，使用更加安全。

　　【關鍵詞】 葛根素注射液 藥液變色 pH值快速下降 過敏反應 問題研究

　　葛根素是由中藥材葛根中提取的有效成份，是一種黃酮類化合物。主要用于：冠心病、心腦血管疾病，視網膜動、靜脈阻塞，突發性耳聾等療效較好。制備葛根素注射液(5ml：200mg)的原料，國內使用純度98%以上的化學合成品。幾年前葛根素注射液市場異常火爆，多家研發機構火速申報，幾十家生產企業紛紛投產。隨著成品貯存期的延長，臨床使用量加大，各種問題逐漸顯現，該品種又成了媒體聲討的對象。葛根素注射液的質量問題如不研究解決，該品種就不能繼續生存下去。

　　1 實驗藥品與儀器

　　小容量注射液生產線(通過國家GMP認證);酸度計PP-15(北京賽德利斯);葛根素原料藥(注射級，煙臺魯銀藥業公司，批號：040407);乙二胺四乙酸二鈉(批號：031104);焦亞硫酸鈉(批號：031017);活性炭(注射級，批號：040905);丙二醇(注射級，美國陶氏化學公司，批號：040407)。

　　2 方法與結果

　　2.1 研發處方 葛根素40g、丙二醇500ml、活性炭5g，制成1000ml。

　　2.2 研發生產工藝 取丙二醇500ml，升溫至65～75℃，稱取葛根素原料40g，溶于丙二醇中攪拌至全溶，取注射用水400ml加入藥液中混均，按容量稱取0.05%(g/v)活性炭，攪拌吸附30分鐘，過濾，定容，測pH值，精濾分裝。100℃，30分鐘滅菌，即得。

　　2.3 葛根素注射液存在的主要質量問題及原因分析

　　2.3.1 貯存過程中藥液變色及原因分析 葛根素注射液剛下線的成品外觀為無色澄明液體或微黃色澄明液體，同批色澤均勻一致。但在貯存1個多月后有部分藥支變為黃色，之后隨著時間延長變色藥支出現率不斷增加(當藥液變為黃色時，變色的藥液pH值也下降至3.7以下)。藥液部分變色導致了同批藥液色澤不一致，外觀性狀不符合規定。

　　分析認為：葛根素屬一種黃酮類化合物，能被一些2～3價的金屬陽離子催化，發生反應，由無色的藥液變成有色的二氫異黃酮類物質。注射用水，配制管線，設備，金屬離子很少，內包裝物安瓿不同支之間可能存在金屬離子分布不均勻的個體差別，因此導致個別藥支在貯存1～3個月內完全變成黃色，且先變色的藥支變色較深。

　　不僅金屬離子催化導致變色，安瓿內的殘氧量也會與葛根素發生反應。導致葛根素發生氧化，生成有色的黃酮衍生物，氧化作用是緩慢發生的，由于各個安瓿內的含氧量不同，氧化反應進程不同。因此，各藥支之間產生了不一樣的色差，導致了安瓿間的色差深淺不一致。

　　2.3.2 貯存過程中pH值快速下降的原因分析

　　葛根素注射液標準規定成品pH值合格范圍3.5～5.5，研發工藝在配制時按慣例將pH值控制在4.5±0.1中限，滅菌后下降約0.3～0.4，貯存時先變黃的藥支pH值均降至3.7以下，6個月后其它色澤較淺的藥支也下降至3.9以下。PH值的快速下降，表明葛根素注射液藥液內部沒有達到穩定體系，化學反應一直在運行，各種反應產物呈酸性，造成了pH值快速下降，可以認為pH在5.0 以下藥液穩定性欠佳。

　　2.3.3 臨床應用中過敏反應發生率較高，反應嚴重及原因分析

　　根據國內幾年間發表的資料表明，葛根素注射液臨床應用時過敏反應發生率較其它注射液品種高，有時還很嚴重。研發處方雖無嚴重過敏反應病例出現，但過敏反應出現率也達5～6%。

　　葛根是一種常用中藥材，毒副作用小，已有幾千年的應用歷史，沒有能導致嚴重過敏反應的記載。葛根素注射液中，金屬離子催化的變色反應，貯存中的氧化反應所產生的各種黃酮衍生物質，應是真正的致敏物質。如果注射液中藥液是一個穩定體系，不發生各類反應，少產生與主藥不同的其它物質，就會降低過敏反應發生率，同時減輕過敏反應的程度。

　　2.4 具體實施的改進措施

　　2.4.1 處方、工藝改進的思路 質量穩定，使用安全的藥品是通過正確的處方，合理的工藝制造出來的，不是檢驗出來的，更不是外行能監管出來的。盡管葛根素注射液質量問題嚴重，但只要通過技術改進使其藥液達到一個穩定狀態，就能解決變色、pH值快速下降問題。化學反應物質生成的減少，必然能降低過敏反應的發生，使臨床使用更安全。

　　2.4.2 控制部分藥支變色的措施

　　2.4.2.1 在葛根素處方中添加輔料乙二胺四乙酸二鈉，做為穩定劑。用量為千分之0.2(g/v)使它與安瓿內壁分解出的微量金屬離子絡合，阻止金屬離子對主藥的催化變色反應發生。

　　2.4.2.2 在葛根素處方中添加輔料焦亞硫酸鈉，做為抗氧劑，阻止主藥的氧化反應進程，使藥液最終成為一個穩定的體系。

　　2.4.3 控制pH值快速下降的措施

　　2.4.3.1 合理的確定焦亞硫酸鈉的加入量。藥劑學中焦亞硫酸鈉的使用量為2‰～3‰。如果抗氧劑加入量大，會使藥液在貯存過程中pH值波動加大，不利于穩定體系的形成。如抗氧劑加入量不足，阻止不了氧化反應進程，仍可生成黃酮衍生物質，產生過敏反應，色差等問題。經過試驗篩選，加入量確定為1.5‰，此時體系最穩定。藥液在貯存期二年內始終為無色。如抗氧劑采用亞硫酸氫鈉，藥液則為微黃色。

　　2.4.3.2 適當上調pH值 葛根素pH值控制目標，成品貯存二年后pH值應高于5.0，尤其考慮到抗氧劑加入后，抗氧劑與氧氣反應可生成酸性物質，因此決定上調pH值至5.5上限。貯存中使成品在5.4～5.0弱酸條件下小幅波動。

　　2.4.4 控制過敏反應的措施

　　抗氧劑 絡合穩定劑的使用使變色反應得到控制，藥液不再變色。使pH值穩定主藥葛根素分解成其它過敏物質的機會大大減少了，過敏反應會隨之降低，過敏反應的程度會隨之減弱。

　　2.5 研究結果

　　2.5.1 改進后的處方 葛根素40g，丙二醇500ml，EDTA-二鈉0.2g ，焦亞硫酸鈉1.5g，活性炭5g，制成1000ml。

　　2.5.2 改進后的生產工藝 取丙二醇500ml，加水200ml，升溫至65℃左右，稱取葛根素40g，溶解完全，另取100ml水，加入焦亞硫酸鈉1.5g，EDTA-二鈉0.2g攪拌至全溶后，加入藥液中，混勻。加入活性炭，攪拌吸附30分，過濾脫炭，定容，調節pH值至5.4～5.5之間，精濾分裝，100℃，30分鐘滅菌，即得。

　　2.5.3 改進后的成品與研發成品問題指標對比觀察 將研發工藝生產的成品及其產生部分變色，pH值下降，過敏反應問題指標與改進工藝后的成品這三項指標做一對照觀察，結果見表1。表1 葛根素研發成品與改進后成品問題指標對比(三批綜合)

　　3 討論

　　3.1 藥品研發單位工業生產經驗不足，通過市售藥品成份的測定來反推確定新藥處方組成，制定生產工藝是萬萬要不得的研發方式。應在正確的理論指導下，擬定處方、生產工藝。

　　3.2 藥品生產企業，應該積極參與已委托給研發單位的新藥研制工作，尤其在輔料確定，生產工藝確定方面。否則，新藥投產就會有大錯誤出現，再進行適合工業生產的改進后再申報，就會有很大麻煩。